Use of RFLP markers for identification of individuals homozygous for resistance to Meloidogyne arenaria in peanut
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AbstractTo increase the efficiency of breeding peanuts resistant to Meloidogyne arenaria, we determined the utility of two RFLP loci linked to a single gene for resistance in identifying individuals putatively homozygous for resistance. DNA was extracted from leaf samples collected from each of 548 individuals from three segregating BC7F2:4 breeding populations (TP293-3-3, TP296-4 and TP301-1-8). The DNA was then digested with Eco RI, and Southern blotted to Hybond-N+ membranes. The membranes were probed with the RFLP probe R2430E, the autoradiographs scored for resistance genotype, then stripped and re-probed with the probe R2545E. Samples from which no data were obtained due to problems in extraction, digestion, or hybridization ranged from a low of 14.4% for TP301-1-8 probed with R2430E to a high of 38.9% for TP296-4-4 probed with R2545E. Locus R2430 identified 27.6, 65.1 and 29.5% of populations TP293-3-3, TP296-4-4 and TP301-1-8, respectively, as being homozygous for resistance. The second locus, R2545E, identified 24.5, 50 and 23.5%, respectively, of these populations as homozygous for resistance. In glasshouse tests of nematode reproduction on progeny of individuals identified as homozygous for resistance based on RFLP patterns, all 15 individuals of each of the 11 single plant progeny lines tested were resistant. Conversely, all progeny from an individual identified as susceptible to M. arenaria based on RFLP patterns supported high levels of nematode reproduction. Utilisation de marqueurs RFLP pour l'identification d'individus homozygotes pour la rsistance envers Meloidogyne arenaria chez l'arachide - Pour accrotre l'efficacit dans les croisements d'arachides rsistantes Meloidogyne arenaria, nous avons dmontr l'utilit de deux loci RFLP lis un seul gne de rsistance en identifiant des individus potentiellement homozygotes pour cette rsistance. L'ADN a t extrait d'chantillons de feuilles prlevs sur chacun des 548 individus provenant de trois populations appartenant des croisements sparant BC7F2:4 (TP293-3-3, TP296-4-4 et TP301-1-8). L'AND t ensuite digr par ECO RI et transferr par Southern blotting sur des membranes Hybond-N+. Ces membranes ont t sondes grce une sonde RFLP (CE243OE), les autoradiographies repres pour le gnotype de rsistance, puis dpouilles et sondes nouveau l'aide de la sonde R243OE. Les chantillons ne fournissant aucune donne - cela d des problmes d'extraction, de digestion ou d'hybridisation - reprsentent de 14,4% pour la population TP-301-1-8 sonde par R2430E 38,9% pour la population TP296-4-4 sonde par R2545E. Le locus R2430 a identifi 27,6, 65,1 et 29,5% des populations TP293-3-3, TP296-4-4 et TP3O1-1-8, respectivement, comme homozygotes pour la rsistance. Le second locus, R2545E, a identifi 24,5, 50 et 23,5%, respectivement, de ces trois populations comme homozygotes pour la rsistance. Lors d'expriences en serre concernant la reproduction du nmatode sur la descendance d'individus identifis, sur la base de profils RFLP, comme hymozygotes pour la rsistance, chacun des 15 individus de chacune des 11 lignes monoparentales testes se sont montrs rsistants. A l'inverse, tous les descendants d'un individu identifi, sur la base des profils RFLP, comme sensible M. arenaria, permettent un taux lev de reproduction du nmatode.
