Guidelines for diagnosis of swine influenza
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Este trabalho descreve a colheita adequada de amostras, as tcnicas/procedimentos disponveis para o diagnstico de influenza A em sunos, assim como os resultados e suas respectivas interpretaes, para auxiliar mdicos veterinrios de campo na identificao dessa doena. Em sunos vivos, as amostras adequadas so: secreo nasal, fluido oral e sangue (soro). Para sunos mortos, colher preferencialmente amostras de pulmo com consolidao cranioventral. Secreo nasal e fragmentos de pulmo refrigerado so utilizados para detectar partcula viral vivel (isolamento viral - IV) ou cido nucleico viral (RT-PCR convencional e RT-PCR em tempo real). As amostras no devem ser congeladas, pois o vrus inativado a -20C. A caracterizao molecular dos isolados feita pela anlise filogentica obtida pelo sequenciamento de DNA. O soro utilizado para a deteco de anticorpos (Acs) por meio do teste da inibio da hemaglutinao e ELISA. O fluido oral pode ser utilizado para deteco de anticorpo (ELISA) ou de vrus. Fragmentos de pulmo fixados em formol a 10% so examinados microscopicamente para identificar pneumonia broncointersticial e para deteco de antgeno viral pela imuno-histoqumica (IHQ). Para o sucesso do diagnstico, as amostras devem ser colhidas de sunos que esto preferencialmente na fase aguda da doena, para aumentar as chances de deteco viral. As melhores opes para o diagnstico de influenza A em sunos vivos so RT-PCR e isolamento viral de amostras de swab nasal ou fluido oral. Pulmo para anlise por RT-PCR, isolamento viral ou IHQ a amostra de escolha em sunos mortos. Testes sorolgicos tm valor diagnstico limitado e so utilizados apenas para determinar o estado imune do rebanho, no indicando doena clnica, pois os Acs so detectados 7-10 dias ps-infeco (fase subaguda). O diagnstico de influenza importante para avaliar o envolvimento desse agente no complexo de doena respiratria suna. Alm disso, o isolamento do vrus influenza essencial para o monitoramento dos principais subtipos circulantes em uma determinada regio ou pas, assim como para a deteco de novos rearranjos virais, j que influenza considerada uma zoonose.
